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二氧化碳培養(yǎng)箱工作原�
�(fā)布時(shí)間:2017-08-16   �(diǎn)擊次�(shù)�469�

二氧化碳培養(yǎng)�是現(xiàn)代大中型�(yī)院�(jìn)行科�(xué)研究必不可少的重要設(shè)�,分布于�(yī)院各�(gè)�(shí)�(yàn)室。它通過(guò)在培�(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一�(gè)類似�(xì)胞組織在生物體內(nèi)的生�(zhǎng)�(huán)境如恒定的酸堿度(pH值:7.2—7.4),穩(wěn)定的溫度(37�),較高的相對(duì)濕度(95%),穩(wěn)定的二氧化碳水平(5%),來(lái)�(duì)組織、細(xì)�、細(xì)菌�(jìn)行體外培�(yǎng)的一種裝�。常用的二氧化碳培養(yǎng)箱有兩種類型:氣套式和水套式。二氧化碳培�(yǎng)箱有兩條基本的要求:一是要�

  二氧化碳培養(yǎng)�能夠?qū)囟?、二氧化碳濃度和濕度提供�(wěn)定的控制,以便于其研究工作的�(jìn)�;二是要求二氧化碳培養(yǎng)箱能�?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染�(jìn)行有效的防范,并能夠定期消除污染,以保護(hù)研究成果,防止樣品損��

  1 二氧化碳培養(yǎng)�基本工作原理

  水套式二氧化碳培�(yǎng)箱的溫度是通過(guò)電熱絲給水套�(nèi)的水加熱,再通過(guò)箱內(nèi)溫度傳感器來(lái)檢測(cè)溫度變化,使箱內(nèi)的溫度恒定在�(shè)置溫度。氣套式二氧化碳培養(yǎng)箱的加熱是通過(guò)遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接�(duì)�(nèi)箱體�(jìn)行加熱的,又叫六面直接加熱。氣套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點(diǎn),特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁�(kāi)�(guān)的培�(yǎng)。箱�(nèi)溫度一般設(shè)定在37℃左�。二氧化碳培�(yǎng)箱控制二氧化碳的濃度是通過(guò)二氧化碳濃度傳感器來(lái)�(jìn)行的。二氧化碳傳感器用來(lái)檢測(cè)箱體�(nèi)二氧化碳濃度,將檢測(cè)�(jié)果傳遞給控制電路及電磁閥等控制器�,如果檢�(cè)到箱�(nèi)二氧化碳濃度偏低,則電磁閥打�(kāi),二氧化碳�(jìn)入箱�

  �(nèi),直到二氧化碳濃度達(dá)到所�(shè)置濃�,此�(shí)電磁閥關(guān)閉,箱內(nèi)二氧化碳切斷,達(dá)到穩(wěn)定狀�(tài)。二氧化碳采樣器將箱�(nèi)二氧化碳和空氣混合后的氣體取樣到�(jī)器外部面板的采樣�,以隨時(shí)用二氧化碳濃度測(cè)定儀�(lái)檢測(cè)二氧化碳的濃度是否達(dá)到要求。目前大多數(shù)的二氧化碳培�(yǎng)箱是通過(guò)增濕盤的蒸發(fā)作用�(chǎn)生濕氣的(其產(chǎn)生的相對(duì)濕度水平可達(dá)95%左右,但�(kāi)門后濕度恢�(fù)速度很慢)。因?yàn)闈穸日舭l(fā)面積越大,越容易�(dá)到相�(duì)飽和濕度并且�(kāi)�(guān)門后的濕度恢復(fù)的時(shí)間越�。所以濕度蒸�(fā)面積大的培養(yǎng)箱較濕度蒸發(fā)面積小的培養(yǎng)箱容易保

  持相�(duì)飽和濕度�

  2 一定要做好使用前的�(zhǔn)備工�

  二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)�(zé)使用,操作盤上的任何�(kāi)�(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,不要隨意扭�(dòng),以免影響箱�(nèi)溫度,二氧化碳濃�,濕度的波動(dòng),同�(shí)降低�(jī)器的靈敏�。箱子的放置要水平,避免�(yáng)光直射和灰塵�,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及�(cè)面應(yīng)留出5 cm的空�。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波�(dòng)不超�(guò)220 V±10%。所加入的水必須是蒸餾水或無(wú)離子水,防止礦物�(zhì)�(chǔ)積在水箱�(nèi)�(chǎn)生腐蝕作�,經(jīng)常檢查箱�(nèi)水是否足�,水位應(yīng)加至“水位指示�”滅燈�(shí)為止。使用前箱內(nèi)�(yīng)用消毒酒精或碘溶液徹底擦�,防止其他微�

  物污染,�(dǎo)致實(shí)�(yàn)失敗。在房間安裝空調(diào),使�(huán)境溫度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳�(guò)濾裝��

  3 正確充氣延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽�

  二氧化碳培養(yǎng)箱箱�(nèi)氣壓由二氧化�?xì)怏w傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求�(jìn)氣壓為Medical Equipment Vo1.22,No.4 0.06 MPa。當(dāng)箱內(nèi)氣壓降低�(shí),二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地�(kāi)閉,向箱�(nèi)慢慢充氣,當(dāng)�(jìn)氣壓�(dá)0.1 MPa�(shí),自�(dòng)停止�(diào)節(jié)。如充氣方法不當(dāng),使�(jìn)氣壓力增�,當(dāng)超過(guò)0.1 MPa甚至0.2 MPa壓力,會(huì)損傷二氧化碳傳感�。開(kāi)始這種損傷效應(yīng)不明�,不易察�(jué),反�(fù)�(cuò)誤操�,二氧化碳傳感器損傷累積終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈。因�,二氧化碳傳感器壽命與二氧化碳�(jìn)氣壓大小有關(guān),只要做好�(jìn)氣壓�(diào)節(jié),就能保�(hù)二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器�(jià)格昂�,更換不�,所

  以一定要做好�(jìn)氣壓�(diào)節(jié),延�(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命�

  4 做培�(yǎng)�(shí)注意培養(yǎng)箱濕�

  箱內(nèi)濕度�(duì)于培�(yǎng)工作�(lái)�(shuō)是一�(xiàng)非常重要然而又�(jīng)常被忽略的因�。因?yàn)轱柡蜐穸拳h(huán)境可以避免培�(yǎng)液中二氧化碳逃�,培�(yǎng)液中pH值穩(wěn)定,有利于細(xì)胞生�(zhǎng),足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在�(kāi)�(guān)門�)才能保證不會(huì)由于�(guò)度干燥而導(dǎo)致培�(yǎng)失敗。所以二氧化碳培�(yǎng)箱使用過(guò)程中,在箱內(nèi)托盤中放一定量的滅菌水(3/2至全�),使箱內(nèi)成為飽和濕度�(huán)�。如使用者忘記補(bǔ)加水,使培養(yǎng)�(xì)胞處于低濕度甚至干熱�(huán)境中,培�(yǎng)液二氧化�?xì)怏w易揮�(fā),液體pH值升�,影響細(xì)胞生�(zhǎng),在工作中要力求避免此問(wèn)題發(fā)�。樣本多�(shí),箱�(nèi)分區(qū)存放,培�(yǎng)物用筐或瓷盤存放,這樣存取快速,縮短�(kāi)門�(shí)�,減少箱�(nèi)氣體和濕度變化,節(jié)省氣�,穩(wěn)定了�(xì)胞生�(zhǎng)�(huán)境�

  5 防止二氧化碳培養(yǎng)箱污染做好箱�(nèi)消毒二氧化碳培養(yǎng)箱污染是�(dǎo)致細(xì)胞培�(yǎng)失敗的一�(gè)主要因素,所以要減少和防止污染的�(fā)生,主要途徑是盡量減少微生物可以生長(zhǎng)的區(qū)域和表面,采取消毒措�。例�,針�(duì)箱內(nèi)濕熱�(huán)境易滋生�(xì)菌等�(wèn)�,我們采用在1000 mL水中�2 mL新潔爾滅�,定期用酒精和紫外線消毒箱內(nèi)空氣,培�(yǎng)物酒精擦拭人箱內(nèi),盤里的水至少要一周換一次,控制污染,可以維持適�(yīng)的蒸�(fā)作用,減少箱�(nèi)微生物滋生速度。為了培�(yǎng)箱免受污染并且保證儀器箱體內(nèi)的生物清潔�,有些二氧化碳培�(yǎng)箱設(shè)�(jì)了自�(dòng)排除污染裝置�(lái)有效防止污染的產(chǎn)�。目前有多種消毒滅菌方式� 如帶有紫外消毒功能的CO2培養(yǎng)�。還有的�(shè)�(jì)生產(chǎn)了HEPA�(guò)濾器能過(guò)濾培�(yǎng)箱內(nèi)空氣,可�(guò)濾除�99.97%�0.3/an以上的顆�,此�,還有設(shè)�(jì)了能使箱�(nèi)�(dá)到高溫濕熱的�(huán)境從而殺死污染微生物,達(dá)到消毒滅菌目的的培養(yǎng)��